Тест "МультиЛаб" Ротавирус в кале Арт. 003

Набор для экспресс-анализа ротавируса в кале «Мульти Тест» №003 

Иммунохроматографический тест для качественного определения антигенов Rotavirus в кале с целью выявления ротавирусной инфекции. 

Ротавирус – наиболее частая причина острого гастроэнтерита, в основном у детей. Открытие вируса в 1973 году и его связь с детскими гастроэнтеритами показали важный прогресс в изучении небактериальных гастроэнтеритов. Ротавирус попадает в организм алиметарным путем, инкубационный период составляет 1-3 дня. Несмотря на это образцы кала должны собираться со 2 по 5 день заболевания, что является оптимальным для обнаружения антигенов ротавируса, который может обнаруживаться на всем протяжении диареи. Ротавирусный гастроэнтерит может быть причиной смертности в популяциях с высоким риском – дети, пожилые, иммунокомпрометированные пациенты.

Ротавирус чрезвычайно сложно культивировать, поэтому разработаны различные методы определения ротавируса в кале, одним из которых является иммунохроматография с качественным определением антигенов вируса в кале в течение 10 минут.

Принцип метода

В тест-зоне мембрана покрыта моноклональными антителами к антигенам ротавируса.

Во время исследования, образец вступает в реакцию с частицами, покрытыми антителами к вирусу анти-Rotavirus, предварительно высушенными на мембране тест-полоски. Под действием капиллярных сил биологический материал продвигается по мембране. В случае положительного результата специфические антитела на мембране вступают в реакцию с окрашенным конъюгатом (в тест-зоне) и вызывают окраску тест-полоски. Окрашенная полоса в контрольной зоне должна проявляться всегда. Она свидетельствует от том, что:

1. внесено достаточное количество образца,
2. достигнут необходимый поток,
3. внутренний процедурный контроль.

Реагенты

Тест содержит частицы, покрытые антителами к ротавирусу, и антиротавирусные антитела, содержащиеся в мембране.

Меры предосторожности

Не использовать после истечения срока годности.

Экспресс-тест должен оставаться в запечатанной упаковке до использования.

Не принимать пищу, не пить и не курить в помещении, где выполняются исследования.

Не использовать тест, если повреждена упаковка.

Работать с образцами как с инфекционным материалом, применять все меры, направленные на обеспечение микробиологической безопасности, следовать стандартным процедурам по обработке образцов.

Во время тестирования использовать защитную одежду, перчатки, очки (щитки).

Влажность и температура могут неблагоприятно повлиять на результат исследования.

Стабильность и хранение

Тесты хранить в упакованном виде при комнатной температуре (2-30 ^оС). Не замораживать. Не использовать по истечении срока годности, указанного на упаковке.

Сбор образцов и подготовка к исследованию

Детекция вируса улучшается, если сбор образцов происходит в начале заболевания. Максимальная экскреция вируса у пациентов с гастроэнтеритом отмечается на 3-5 дни от момента появления симптомов. Если образцы собираются позже, количество антигена может быть недостаточным для получения позитивного результата или определяемые антигены могут быть не связаны с эпизодом диареи.

Образцы кала должны  собираться в чистый, сухой, влагоустойчивый контейнер без содержания детергентов, консервантов и питательных сред.

Компоненты тест-системы перед использованием должны находиться при комнатной температуре.

Материалы

Аналитический элемент, содержащий антиротавирусные антитела

Флакон с буферным раствором для образца

Пипетка-капельница

Инструкция по применению

Материалы, не входящие в состав набора

Контейнеры для сбора материала

Секундомер

Перед использованием все компоненты набора, образцы выдержать при комнатной температуре.

Процедура теста

1. Собрать достаточное количество кала (1-2 г или 1-2 мл при жидком стуле) в сухой, чистый контейнер для сбора образцов. Будут получены лучшие результаты, если исследование будет проведено в течение 6 часов после сбора. Если исследование не может быть выполнено в течение 6 часов, то образцы можно хранить при температуре 2-8 ^ОС в течение 3 дней. Для длительного хранения образцы должны быть заморожены при -20 ^оС.
2. Обработка образцов кала

для оформленных образцов:

Используйте отдельную пробирку для каждого образца. Открутить колпачок пробирки и ввести палочку как минимум в 3 разных места образца кала, чтобы набрать 50 мг (примерно ¼ горошины). Не использовать лопатку.

для жидких образцов:

держать пипетку-капельницу вертикально, произвести аспирацию образца, затем перенести
2 капли (примерно 50 мкл) во флакон для сбора образца с буферным раствором.

Закрыть крышкой флакон для сбора образца, затем энергично потрясти флакон для перемешивания внесенного образца с буферным раствором.

    3. Выдержать экспресс-тест при комнатной температуре перед использованием. Достать тест-кассету из упаковки. Для получения лучших результатов исследование должно быть выполнено непосредственно после вскрытия упаковки.

    4. Держать флакон с образцом вертикально, затем отвинтить колпачок и открыть флакон. Далее перевернуть флакон и внести 2 полные капли (примерно 80 мкл) смеси образца с буферным раствором в лунку образца (S) и включить таймер. Избегать образования пузырьков воздуха в лунке S. См. рис. ниже.

    5. Учесть результаты теста через 10 минут. Не оценивать результаты исследования после истечения 20 минуты.

Примечание: Если образец не мигрирует (присутствуют частицы), центрифугировать образец, содержащийся во флаконе с буфером. Взять 80 мкл супернатанта и внести его в лунку S для образца. Включить таймер, и продолжить далее с п.5 настоящей инструкции.

Интерпретация результатов

* Примечание: интенсивность цветной полоски в тестовой зоне Т может варьироваться в зависимости от концентрации антигена в образце. Тем не менее, наличие окрашенной линии любой интенсивности в зоне Т должно рассматриваться как положительный результат.

Ограничения теста:

1. Данный экспресс-тест указывает только на наличие/отсутствие антигенов Rotavirus в кале (качественное определение).
2. Экспресс-тест будет определять только наличие ротавируса в кале. Экспресс-тест не должен использоваться как единственный критерий, подтверждающий этиологическую роль ротавируса при диарее.
3. Как и для всех диагностических тестов, результаты должны интерпретироваться совместно с клинической картиной.
4. Если результаты теста отрицательные, а клинические симптомы присутствуют, рекомендуется провести дополнительное обследование пациента. Отрицательный результат не исключает вероятность наличия ротавирусной инфекции.